「青莲客户文献」华支睾吸虫感染的免疫蛋白质组学分析 - 哔哩哔哩

2021年10月18日，Wang Chunren的团队来自Bayi农业填海大学寄生虫小组Wang Chunren，在线发表在前细胞感染Microbiol杂志上，题为“ Myoferlin的鉴定”，这是Clonorchi的潜在血清抗原。不同的感染期和排泄物分泌产物Offclonorchis sinesnsis”。乐购疾病是中国睾丸引起的重要食物疾病。这项研究采用了液态色谱连接光谱（LC-MS/MS），以分析免疫共沉淀（CO-IP）分析（Qinglian Baiao提供技术支持）kaiyun全站app登录入口，以探索C. sinensis的排泄物分泌产物（ESP）作为A，病原体在宿主 - 寄生虫相互作用中起着重要作用。

中国遗嘱测试是重要的稻田衍生病原体。它主要影响哺乳动物，例如狗kaiyun.ccm，猫和人类。它的典型临床症状包括黄疸，胆管炎和胆汁障碍。中国分支机构的乐购疾病也与肝纤维化，其他人类肝脏和胆囊疾病和胆管（CCA）密切相关。因此，在这项研究中，感染收集了7天14天，35天和77天kaiyun全站网页版登录，收集了兔子血清和中国测试的中国测试，并同时进行了免疫共同测试（CO-IP）实验。液相色谱串联质谱仪（LC-MS/MS）的组合评估并代表免疫复合物。该研究的目的是确定ESP中的灵敏度和特定抗原靶标，并为Huami测试提供更多潜在的诊断靶标。

实验结果

C. Sineensisp蛋白检测

甲状腺念珠菌ESP中大多数蛋白质的分子量为10〜170KU，总共检测到334种蛋白质，其中254种蛋白质被注释。

图1。ESP蛋白质成分的质谱分析

C. sineensisp蛋白在不同感染期间用兔子血清检测

使用免疫心脏组来鉴定辛辛斯分泌的蛋白质，尤其是使用Sineensisess的蛋白质，该蛋白可能参与宿主与寄生虫与血清相互作用的相互作用。 co-IP结果表明，可以识别7、14、35和77天血清中的抗体，并从C. sineensisesp中拉下特定的蛋白质，大多数蛋白质的分子量范围为15至170 kU。 LC-MS/MS的结果表明，只能在早期（7天）中检测到五种蛋白质，这可以解释它们在宿主中诱导早期反应，并发现三种蛋白质在四个时期内是特异性的。包括动态蛋白光链1（Dynein Light Chain-1），Dynein Light Chain-2和肌膜蛋白。参与人体运动和能量代谢的这三种蛋白质在不同阶段显示出很高的表达。为C. sineensis提供能量。

图2。不同感染的时间点C. Sineensis ESP蛋白

分析交互式蛋白的KEGG信号通道

27种类型的蛋白质参与在sinensis中检测到的宿主 - 寄生虫相互作用，但在利弗拉和japonicum链球菌中未检测到。 KEGG分析表明，这些蛋白质主要参与氧化磷酸盐酸化，膜转移，信号转移和代谢。每个感染期间蛋白质的丰度不同。囊肿骨骼，氧化物磷酸化和mRNA监测途径相关蛋白在早期（7天）表达，可能参与早期免疫。在寄生虫感染的中间（14天）中，与膜相关的蛋白质相关的蛋白质显着增加，并且在为寄生虫提供能量方面可能起重要作用。在晚期（35天零77天）高度表达了点头样受体信号通路，谷胱甘肽代谢和相关蛋白质； C. sineensis可以有效地消除活宿主释放的蛋白质以保护自身的蛋白质。

图3。在不同感染期间的KEGG分析

重新组织蛋白的基因克隆和抗原性分析

为了获得更好的表达，根据生物学信息（MYOF1和MYOF2）提供的抗原表，将肌肉蛋白切成两个部分。特定的寡核苷酸引物用于扩增MyOF1和MyOF2（1500bp和810bp）基因，并将其克隆到大肠杆菌PET32A表达载体上。克隆的Myof1和Myof2在大肠杆菌BL21细胞中成功表达。对重组的蛋白质进行了SDS-PAGE分析，分子量约为60kU（MyOF1）和31kU（MyOF2）。可以在兔曲霉感染中在不同水平的血清中检测到该蛋白质，并且在Japonica和F. hepatica感染的血清中尚未检测到这种蛋白质，这表明肌表链蛋白可能是检测中国测试的潜在抗原。

图4。MYOF1和MYOF2的表达和抗原分析

概括

Huazhi遗嘱昆虫疾病是一种面向食物的昆虫疾病，在中国，韩国和越南引起了广泛关注。流行病学和实验研究报告说，中国睾丸的感染可以诱导胆汁上皮增生，胆管的可延展性以及胆管的变化，也可能促进胆管癌的发生。 C. sineensis不断从排泄端口释放到外界，以释放ESP（诸如蛋白质，碳水化合物和脂质之类的复杂混合物）。暴露于ESP的细胞会产生多种病理反应，包括增殖，凋亡，氧化和恢复稳态损伤以及稳定的损害以及破坏以及还原的氧化减少。炎症等。因此，在ESP中鉴定蛋白质成分对于我们了解诱导的寄生虫的发病机理至关重要。结果表明，本研究中使用的免疫蛋白组在中国的血清抗原抗原诊断中可能具有重要作用。此外，肌曲线蛋白可能是通过Huami测试诊断的潜在生物标志物。

分析中国测试的不同感染期间血清和排泄物分泌产物的免疫蛋白质组

期刊名称：前细胞感染微生物

影响因子：4.123

样本选择：

中国测试和兔子血清样品感染后的7天14天，35天和77天；

F.livera和Japonicum感染了阳性兔子血清（用于对照的病原体细菌）；

来自感染兔子的胆管与中国睾丸分离以提取ESP蛋白质。

技术策略：COIP-MS（COIP-MS）